In Vivo Investigation of Dietary Exposure to 5

In Vivo Investigation of Dietary Exposure to 5 Pesticides

1 Resumé

Rotter (MOL/Wist (Hannover), SPF), 3 hold af 6 hanner og 6 hunner per hold blev eksponeret for en kombination af pesticider via foder i overens-stemmelse med OECD TG 407 med visse afvigelser. Udvidet observation, som foreskrevet i OECD TG 407, med henblik på undersøgelser for ændret adfærd blev ikke foretaget udover udvidet observation af dyrene uden for bu-rene i forbindelse med vejning af dyrene og ved aflivningen.

Analyse for natrium og kalium i plasma blev ikke foretaget. I stedet for blev der analyseret for kalcium og cholinesterase aktivitet i plasma og cholinestera-se aktivitet og protein i hjernehomogenat.

Chlorpyrifos (CH), bromopropylat (BR), alfacypermethrin (AL), carbenda-zim (CB) og mancozeb (MA) blev samlet iblandet pulveriseret chowfoder (Altromin), der blev slået til pellets, i koncentrationer, der for de enkelte stof-fer svarede til 1/5 af NOAEL, NOAEL og 5 gange NOAEL. Kontrolholdet på 6 hanner og 6 hunner fik samme foder dog kun iblandet vehikel (acetone).

Efter 1 døgns dosering udviste dyrene i hold 4 varierende symptomer på ned-stemthed og bevægelsesforstyrrelser. Fire dyr måtte aflives umiddelbart. De øvrige dyr fik efterfølgende kontrolfoder i 2 dage, og ved aflivningen var ovennævnte kliniske symptomer forsvundet.

En enkelt han i hold 3 var stritpelset den første dag efter tildeling af testfoder. Hos én han blev observeret skorpedannelse omkring venstre øje i forperioden og under doseringsperioden.

I forbindelse med sektionen observeredes tegn på ændret adfærd af dyrene i hold 3. Sammenholdt med dyrene i hold 1 og 2 virkede dyrene i hold 3 mere aktive og følsomme for lyd, ligesom dyrene ikke på noget tidspunkt faldt til ro i burene. Dyrene var i en tilstand, der kan beskrives som “vedvarende explo-rativ”. Der var tale om subjektive observationer, der ikke kan kvantiteres.

Legemsvægt og tilvækst for hanner og hunner var sammenlignelige holdene imellem.

Bortset fra en statistisk signifikant øget foderindtagelse for hanner i hold 3 i anden doseringsuge er data sammenlignelige holdene imellem.

Hold 3, hunner havde et statistisk signifikant nedsat foderforbrug i første, an-den og fjerde doseringsuge. Relativt foderforbrug var kun statistisk signifikant lavere for hold 3, hunner i første doseringsuge.

For hunnerne i hold 3 var der et statistisk signifikant lavere vandforbrug og relativt vandforbrug i alle doseringsuger. Hunnerne i hold 2 udviste et lignen-de lavere vandforbrug og relativt vandforbrug i de to første doseringsuger.

Doseringen medførte følgende statistisk signifikante effekter på følgende plasma parametre: Cholinesterase: Hunner, hold 2 havde lavere niveau end hold 1.

Kreatinin: Hunner, hold 3 havde lavere niveau end hold 1. Glucose: Hunner, hold 3 havde lavere niveau end hold 1.

Doseringen medførte ikke nogen statistisk signifikant effekt på følgende plasma parametre for han og hun rotter: ALAT, albumin, alkalisk fosfatase, kalcium, cholesterol, protein og urea.

Doseringen medførte følgende statistisk signifikante effekter for hjerne choli-nesterase / hjerne protein: Hunner: Hold 2 og 3 har et dosis afhængigt lavere niveau end hold 1. I hanner ses et tilsvarende dosis afhængigt fald, men effekten er ikke signifikant (se tabel A1).

Hanrotter i hold 2 og 3 viste et statistisk significant (p<0,05) lavere gennem-snit for WBC i sammenligning med kontrolholdet. Ved differentialtælling fandtes gennemsnit for neutrofile granulocyter statistisk signifikant (p<0,05) højere for hold 3 i sammenligning med kontrolholdet. En lignende tendens observeredes for hunrotter, dog uden statistisk signifikans (se tabel A2).

Ved obduktionen fandtes ingen makroskopiske forandringer af 4 hunrotter i hold 4 aflivet efter 1 døgns dosering. De øvrige han og hunrotter i hold 4 blev aflivet 4 dage efter forsøgets start. Disse blev ikke obduceret.

Ved obduktion af han og hunrotter i hold 1, 2, og 3 fandtes i forskellige organer tilfældige blødninger, som normalt kan observeres i forbindelse med be-døvelse med kuldioxid. De øvrige få forandringer skønnes tilfældige og uden sammenhæng med behandlingen.

Behandling medførte en statistisk signifikant forøgelse af både den absolutte (p<0,05) og relative (p<0,001) levervægt for han- og hunrotter i hold 3 (se tabel A3). For de øvrige organer konstateredes ingen effekt af behandlingen.

Ved den histopatologiske undersøgelse af 4 hunrotter aflivet efter 1 døgns dosering fandtes i leveren moderat diffus single cell degeneration/nekrose samt hyperchrome nerveceller i storhjernen. Disse forandringer, som skønnes rela-teret til behandlingen, blev ikke observeret i nogle af de øvrige dyr aflivet ved forsøgets afslutning.

Hos de øvrige han- og hunrotter, som blev aflivet ved forsøgets afslutning, observeredes få og tilfældige histopatologiske forandringer i hold 1 og hold 3. Ingen af forandringerne i hold 3 skønnedes at være relateret til behandlingen, hvorfor histopatologisk undersøgelse af hold 2 ikke blev foretaget.

Med forbehold for de variationer, der kan være i forsøgsbetingelserne mellem den aktuelle undersøgelse og de undersøgelser, der ligger til grund for de valgte koncentrationer i foderet i det aktuelle forsøg, viser resultaterne, at samtidig eksponering for en blanding af pesticider resulterer i en toksisk effekt i forsøgsdyr, der er forskellig fra den, man ser ved eksponering for de enkelte pesticider i blandingen. For nogle af de målte parametre kunne den observe-rede effekt tyde på, at der er tale om en additiv effekt af stofferne i den aktu-elle blanding. Ifølge litteraturen er en sådan additiv effekt ikke overraskende (Groten et al 1997 & Jett et al 1999). Vedrørende den påviste hæmning af cholinesterasen og dennes mulige indflydelse på de observerede adfærdsæn-dringer må vurderingen af en eventuel samspilseffekt afvente en tilsvarende undersøgelse af CH alene samt eventuelt en undersøgelse af AL og AL og CH i blanding i IFT’s dyremodel.