Økologisk byfornyelse og spildevandsrensning, 45 – Overlevelse af enterokokker og protozoen Cryptosporidium parvum i urin fra mennesker

Overlevelse af enterokokker og protozoen Cryptosporidium parvum i urin fra mennesker

6 Konklusion

6.1 Projekt 1 – Bakteriologi

Efter en generel reduktion i antal enterokokker til under detektionsgrænsen (1 cfu per ml.) efter 1-4 måneders lagring, blev der efter 5-6 måneders lagring observeret en svag men signifikant stigning i antal enterokokker efter lagring ved 4, 10 og 20ºC. Denne stigning tyder på en øget overlevelse og/eller evne til multiplikation af enterokokker ved langvarig lagring af urin ved flere temperaturer
Bakterieisolater fra agarplader anvendt til påvisning af enterokokker blev ved biokemisk karakterisering og PCR identificeret som tilhørende slægten Enterococcus
Langt hovedparten af testede isolater fra Lokalitet 1 var E. faecium, som havde identisk PFGE type A ("DNA fingeraftryk"). Dette indikerer, at disse isolater er tæt beslæget, eksempelvis kan de stamme fra samme person og/eller de er klonalt relateret som følge af opformering i urinen. Det ser således ud til, at en identisk E. faecium stamme udviste øget overlevelse og/eller evne til multiplikation i urinflaskerne ved de tre undersøgte temperaturer. E. faecium betragtes normalt som en strikt fækal enterokokart
Typning af E. faecium isolater fra Lokalitet 2 viste tre forskellige PFGE typer. Der forekom her således flere forskellige E. faecium stammer som kunne overleve længere tids lagring i urin og/eller havde evnen til at kunne multiplicerer
I urin fra Lokalitet 2 havde alle 12 E. gallinarum stammer, som var isoleret fra såvel åben og lukket tank ved de tre undersøgte temperaturer, identisk PFGE type F. Det ser således ud til, at en identisk E. gallinarum stamme udviste øget overlevelse og/eller evne til multiplikation i urinflaskerne ved de tre temperaturer
Fundene af øget overlevelse og/eller eventuel opformering af E. faecium og E. gallinarum i lagret urin stiller spørgsmålstegn ved at anvende enterokokker som indikator på fækal forurening af urin.Det bør istedet overvejes at anvende E. coli som indikator da denne syntes mere følsom i urin sammenlignet med enterokokker
Der skete generelt en begrænset reduktion i kimtal ved 37ºC i urin i løbet af lagringsperioden. Resultaterne viser, at bakteriekim i urin lagret i 6 måneder kan udvise vækst ved 37ºC inkubering. Anvendeligheden af undersøgelse for kimtal 37ºC til vurdering af den hygiejniske kvalitet af lagret urin syntes således begrænset.

6.2 Projekt 2 – Parasitologi

Æg af C. parvum overlevede relativt kort tid i human urin, <14 dage ved 20ºC og 1-2 måneder ved 10 og 4ºC
Ingen mus kunne inficeres (smittes) i podningsforsøg med æg fra urin der havde været lagret 14 dage ved 20ºC, 1 måned ved 10ºC og 2 måneder ved 4ºC
Der var god overensstemmelse mellem resultater fra viabilitetsundersøgelser og podningsforsøg. Bestemmelse af manglende levedygtighed (viabilitet) (<2% viable æg) med den anvendte metode, syntes således at kunne bruges som indikator for æggenes manglende infektivitet. Det vil i fremtiden kunne anbefales, at bruge cellebaserede assays, eventuelt som supplement til viabilitetsundersøgelser
I modsætning til tidligere danske undersøgelser, men i overensstemmelse med svenske undersøgelser, viste resultaterne, at urin der har været lagret i minimum 2 måneder er fri for levedygtige (viable) og infektive æg af C. parvum. En lagring på to måneder vil også betyde elimination af Giardia æg, idet denne protozo er mere følsom overfor miljøpåvirkninger end Cryptosporidium