| Forside | | Indhold | | Forrige |

Afgivelse af organisk stof fra polymere materialer - mikrobiel vækst

Bilag H
Rådata

På de efterfølgende sider er angivet rådata fra bestemmelserne af kimtal samt de tilhørende AOC-værdier. For hver enkelte prøve (flaske) er der for hver måledag angivet kimtallet (CFU/mL), den observerede spredning (error of mean, E.O.M.) og antallet af plader, der lå til grund for beregningen af kimtallet (N). Kimtallene (P17 og NOX) er for hver enkelt dag omsat til den modsvarende AOC-værdi, hvilket er angivet i tabellernes nederste del. Ved beregning af AOC-værdier blev udbyttekonstanter for P17 og NOX på acetat fra /van der Kooij et al., 1995/ benyttet.

Der blev set bort fra data, hvis prøven var kontamineret med uønsket bakterier, eller hvis vækstkurver i den pågældende prøve afveg stærkt fra de to øvrige triplikater (jævnfør rapportens afsnit 3.3.3). Der blev bort fra data for både P17 og NOX, blot én af de to stammer udviste en afvigende vækstkurve. Ligeledes blev der set bort fra tællinger, hvor der totalt blev optalt mindre end 15 kolonier af den pågældende bakterie. Data, der ikke indgår i beregningerne, er i nedenstående tabeller overstreget.

H.1 Ekstraktionsmetoder (jævnfør kapitel 4)

H.1.1 Ekstraktion uden aktive bakterier

PEX og blåt PEM₍₁₎ materiale blev ekstraheret ved et S/V-forhold på 0,5 cm^-1 over 20 døgn ved 10° C uden omrystning. Efter materialet var taget op, blev ekstrakterne podet med P17 og NOX og inkuberet ved 15° C. Væksten af P17 og NOX blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 20, 25, 27,30, 35, 40 efter forsøgets start. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn. PEX og blåt PEM₍₁₎ materiale blev undersøgt i to forsøg, hvorfor hvert materiale har egne blindværdier.

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da dette var kontamineret med uønsket bakterier.

Der blev set bort fra ekstrakt #3, da dette var kontamineret med uønsket bakterier.

H.1.2 Ekstraktion med P17 og NOX

PEX og blåt PEM₍₁₎ materiale blev ved S/V forhold på 0,5 cm^-1 ekstraheret samme med P17 og NOX. Den samtidig ekstraktion og AOC-bestemmelse forløb over 20 døgn ved 10° C uden omrystning. Væksten af P17 og NOX blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 5, 7, 10, 15, 20 efter forsøgets start. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn. PEX og blåt PEM₍₁₎ materiale blev undersøgt i to forsøg, hvorfor hvert materiale har egne blindværdier.

Der blev set bort fra ekstrakt #3, da dette var kontamineret med uønsket bakterier.

Der blev set bort fra enkelte tællinger af P17, da der totalt blev talt mindre end 15 kolonier.

H.1.3 Ekstraktion med en naturlig population

PEX og blåt PEM₍₁₎ materiale blev ved S/V forhold på 0,5 cm^-1 ekstraheret samme med en naturlig bakteriepopulation. Ekstraktionen forløb over 20 døgn ved 10° C uden omrystning. Væksten af den naturlige population blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 5, 7, 10, 15, 20 efter forsøgets start. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i 14 døgn. Efter materialet var taget op, blev ekstrakterne pasteuriseret, podet med P17 og NOX og inkuberet ved 15° C. Væksten af P17 og NOX blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 20, 25, 27,30, 35, 40 efter forsøgets start. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn. PEX og blåt PEM₍₁₎ materiale blev undersøgt i to forsøg, hvorfor hvert materiale har egne blindværdier.

Der blev set bort fra ekstrakt #2 under AOC-bestemmelsen på grund af afvigende høje NOX værdier.

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da dette ved en fejl ikke blev podet med den naturlige population dag 0.

H.2 Desinfektion af testmateriale (jævnfør kapitel 5)

Materiale blev inden ekstraktionen enten desinficeret ved henstand i chlor-opløsning, ved pasteurisering eller ikke desinficeret. Efterfølgende blev materialet ekstraheret sammen med en naturlig bakteriepopulation. Undersøgelsen blev udført med dels med blåt PEM₍₁₎ materiale og en lav chlor-koncentration og dels med sort PEM materiale og en høj chlor-koncentration.

H.2.1 Blåt PEM₍₁₎ materiale og lav chlor-koncentration

Undersøgelsen blev udført med blåt PEM₍₁₎ materiale og en chlor-koncentration på 1 mg/L chlor. Materialet blev ekstraheret ved et S/V forhold på 1,0 cm^-1 over 20 døgn ved 10° C uden omrystning. Væksten af den naturlige population blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 5, 7,10, 15, 20 efter podning. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i 14 døgn.

Pladerne for ekstrakt #2 dag 7 gik tabt.

H.2.2 Sort PEM materiale og høj chlor-koncentration

Undersøgelsen blev udført med sort PEM materiale og en chlor-koncentration på 22 mg/L chlor. Materialet blev ekstraheret ved et S/V forhold på 1,0 cm^-1 over 55 døgn ved 10° C under omrystning. Væksten af den naturlige population blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 5, 10, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 55 efter podning. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i 14 døgn.

Pladerne for blindprøverne dag 50 gik tabt.

H.3 Sekventielle ekstraktioner (jævnfør kapitel 6)

Sort PEM materialer blev ekstraheret sekventielt ved at ekstrahere det enkelte sæt teststykker af flere omgange. Efter 1. ekstraktion blev teststykkerne overført til frisk testvand, hvor 2. ekstraktion forløb osv. Materialet blev ekstraheret i perioder á 15 døgn ved 10° C ved S/V forhold på 0,5 og 1,0 cm^-1 både uden og under omrystning.

Efter materialet var taget op, blev de enkelte ekstrakter podet med P17 og inkuberet ved 15° C. Væksten af P17 blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 3, 5, 7, 10, 15, 20 (1. ekstraktion), 25 (2.-4. ekstraktion) efter podning. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn.

Der er set bort fra data for både P17 og NN, blot én af de to stammer udviste en afvigende vækstkurve. I tilfælde hvor alle tre vækstkurver afveg fra hinanden, er det valgt at bibeholde alle data.

H.3.1 1. ekstraktion

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da vækstkurven for NN afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra blindprøve #2, , da vækstkurven for NN afveg fra de to øvrige replikater

H.3.2 2. ekstraktion

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da vækstkurven for NN afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater

H.3.3 3. ekstraktion

Der blev set bort fra ekstrakt #2, da vækstkurven for NN afveg fra de to øvrige replikater

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da vækstkurverne for både P17 og NN afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra blindprøve #1, da vækstkurverne for både P17 og NN afveg fra de to øvrige replikater.

H.3.4 4. ekstraktion

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da vækstkurverne for både P17 og NN afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra blindprøve #2, da vækstkurverne for både P17 og NN afveg fra de to øvrige replikater.

H.4 S/V forhold (jævnfør kapitel 7)

H.4.1 S/V forhold på 0,5 og 1,0 cm-1

Blåt PEM₍₁₎ materiale blev ekstraheret ved S/V forhold på 0,5 og 1,0 cm^-1 ved 10° C uden omrystning over 9 og 20 døgn. Efter materialet var taget op, blev ekstrakterne podet med P17 og inkuberet ved 15° C. Væksten af P17 blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 5, 7, 10, 15, 20 efter podning. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn.

Der blev set bort fra blindprøve #3, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater.

20 døgns ekstraktion

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater.

H.4.2 S/V forhold i intervallet 0,06-1,38 cm-1

Blåt PEM₍₂₎ materiale blev ekstraheret ved 7 forskellige S/V forhold i intervallet 0,06 til 1,38 cm^-1 ved 20° C under omrystning over 15 døgn. For S/V forholdene 0,14 og 0,69 cm^-1 blev der endvidere foretaget 5 døgns ekstraktioner. Efter materialet var taget op, blev ekstrakterne podet med P17 og inkuberet ved 15° C. Væksten af P17 blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 15, 20 efter podning. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn.

15 døgns ekstraktion

Der blev set bort fra ekstrakt #3, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra ekstrakt #3, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra blindprøve #3, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater.

H.5 Undersøgelse af udvalgte materialer (jævnfør kapitel 8)

Fem forskellige polymere materialer blev ekstraheret ved et S/V forhold på 0,5 cm^-1 ved 20° C under omrystning over 15 døgn. Efter materialet var taget op, blev ekstrakterne podet med P17 og inkuberet ved 15° C. Væksten af P17 blev fulgt ved bestemmelse af kimtal på R₂A dag 0, 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 15 efter podning. R₂A-pladerne blev inkuberet ved 25° C i to-tre døgn.

H.5.1 Serie 1

Dag 29 efter podning blev ekstrakterne tilsat 20 m g acetat-C/L, hvorefter inkuberingen ved 15° C fortsatte med yderlige bestemmelse af kimtal dag 29, 32, 34 efter podning.

Der blev set bort fra ekstrakt #3, da vækstkurven afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bort fra ekstrakterne #1 og #2, da disse var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved ATP-måling).

Der blev set bort fra alle tre ekstrakter, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved måling af ATP).

Der blev set bort fra alle tre ekstrakter, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved måling af ATP).

H.5.2 Serie 2

Dag 20 efter podning blev ekstrakterne tilsat 25 m g acetat-C/L, hvorefter inkuberingen ved 15° C fortsatte med yderlige bestemmelse af kimtal dag 20, 23, 25 efter podning.

Der blev set bort fra alle tre ekstrakter, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved måling af ATP).

Der blev set bort fra ekstrakt #3, da vækstkurven for P17 afveg fra de to øvrige replikater.

Der blev set bor fra alle tre ekstrakter, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved måling af ATP).

Der blevset bort fra ekstrakt #3, da dette var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved måling af ATP).

Der blev set bort fra ekstrakt #1 og #2, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestemt ved måling af ATP).

H.5.3 Serie 3

Der blev set bort fra ekstrakterne #2 og #3, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestem ved måling med ATP).

Der blev set bort fra ekstrakterne #2 og #3, da de var kontamineret med uønskede bakterier (bestem ved måling med ATP).

Der blev set bort fra ekstrakt #1, da dette var kontamineret med uønskede bakterier (bestem ved måling med ATP).