Hurtigmetoder til screening for coliforme bakterier og E .coli i drikkevand

3 Resultater

Pånær enkelte undtagelser viste alle dobbeltbestemmelser overensstemmende resultater. Resultaterne af dobbeltbestemmelserne er derfor angivet som ét samlet resultat af hensyn til overblikket. Tilfældene med forskelligt resultat i de to bestemmelser er angivet. Resultaterne er sammenfattet i tabel 2 - 6.

Alle positive og negative kontroller reagerede som forventet.

Tabel 2: Resultater for naturlige drikkevandsprøver. For positive prøver er prøvenummer angivet i parentes. Prøve 3 blev fundet positiv for coliforme bakterier, men ikke for E. coli. Prøve 4 og 5 blev fundet positive for såvel coliforme bakterier som E. coli.

Volumen Mod. DS 2255, 37 °C Mod. DS 2255, 44 °C Colilert 18 Colilert Readycult
100 ml 8 negative
2 positive (4,5)
8 negative
2 positive (4,5)
7 negative
2 positive
(4,5)
1 neg./pos.a) (3b))
7 negative
3 positive (3b),4,5)
7 negative
3 positive (3b),4,5)
500 ml 3 negative
2 positive (4,5)
3 negative
2 positive (4,5)
2 negative
2 positive
(4,5)
1 neg./pos.a) (3b))
3 negative
2 positive (4,5)
2 negative
3 positive (3b),4,5)
1000 ml 8 negative
2 positive (4,5)
8 negative
2 positive (4,5)
7 negative
3 positive (3b),4,5)
7 negative
3 positive (3b),4,5)
8 negative
2 positive (4,5)

a) Forskellige resultater i dobbeltbestemmelsen.

b) Prøve 3 fundet positiv for coliforme, men ikke for E. coli.

Samlet viser resultaterne af de naturlige drikkevandsprøver i tabel 2, at der uanset prøvevolumen (100 ml, 500 ml eller 1000 ml) er fuld overensstemmelse mellem alle metoderne for prøverne 1 – 2 og 4 – 10, hvor prøve 4 og 5 findes positive for både coliforme bakterier og E. coli, mens øvrige prøver findes negative.

Prøve 3 findes i varierende grad positiv med de kommercielle metoder, men ikke med den modificerede DS 2255.

Tabel 3: Resultater for prøver podet med E. coli. Podeniveau: 10 – 100 (ca. 30) cfu pr. prøve. Tallene angiver % positive prøver (n = 5) for hhv. coliforme bakterier og E. coli.

Volumen Positive for Mod. DS 2255
37 °C
Mod. DS 2255
44 °C
Colilert 18 Colilert Readycult
100 ml Coliforme 100%   100% 100% 100%
E. coli   100% 100% 100% 100%
500 ml Coliforme 100%   100% 100% 100%
E. coli   100% 100% 100% 100%
1000 ml Coliforme 100%   100% 100% 100%
E. coli   100% 100% 100% 100%

Resultaterne i tabel 3 viser, at ved podning af naturlige prøver med E. coli i niveauet 10 – 100 cfu kan E. coli påvises med alle metoder uanset prøvevolumen.

Tabel 4: Resultater for prøver podet med A. hydrophila (non-coliform). Podeniveau: ca. 1 – 80 cfu pr. prøve. Tallene angiver % positive prøver (n = 5) for hhv. coliforme bakterier og E. coli.

Volumen Positive for Mod. DS 2255
37 °C
Mod. DS 2255
44 °C
Colilert 18 Colilert Readycult
100 ml Coliforme 0%   0% 0% 0%
E. coil   0% 0% 0% 0%
1000 ml Coliforme 0%   0% 0% 0%
E. coli   0% 0% 0% 0%

Resultaterne i tabel 4 viser, at der ved podning af naturlige prøver med A. hydrophila ikke påvises coliforme bakterier og dermed heller ikke E. coli i nogen af prøverne.

Podeniveauet viste sig at være lavere end beregnet i nogle af prøverne og svingede fra ca. 1 til 80 cfu pr. prøve med:

Ca. 1 cfu i prøve 7 og 9, 1 – 10 cfu i prøve 8, 28 cfu i prøve 10 og 80 cfu i prøve 6.

For de helt lave podeniveauer på ca. 1 cfu er der pga. den statistiske fordeling af organismer i fortyndingen en risiko for, at der reelt ikke er tilsat bakterier til prøven, men da der selv ved tilsætning af 28 – 80 cfu ikke ses positiv reaktion i prøverne konkluderes det, at A. hydrophila ikke detekteres som coliforme bakterier med de afprøvede metoder.

Tabel 5: Resultater for prøver podet med Klebsiella pneumoniae (coliform). Podeniveau: ca. 3 – 20 cfu pr. prøve. Tallene angiver % positive prøver (n = 5) for hhv. coliforme bakterier og E. coli.

Volumen Positive for Mod. DS 2255
37 °C
Mod. DS 2255
44 °C
Colilert 18 Colilert Readycult
100 ml Coliforme 100%   100% 100% 100%
E. coli   0%a) 0% 0% 0%
1000 ml Coliforme 100%   100% 100% 100%
E. coli   0%a) 0% 0% 0%

a) Rørene viste farveomslag, men var negative for indolproduktion ved 44 °C.

Podeniveauet viste sig at være lavere end beregnet i nogle af prøverne og svingede fra ca. 3 – 20 cfu pr. prøve med:

3 cfu i prøve 6, 6 – 7 cfu i prøverne 7 –9 og 20 cfu i prøve 10.

I lighed med podeniveauerne for A. hydrophila kan der med de lave podeniveauer på ca. 3 cfu være en risiko for, at der reelt ikke er blevet tilsat bakterier til prøverne, men det kan konstateres, at alle prøver reagerer positivt og således har indeholdt Klebsiella.

Tabel 6: Resultater for prøver podet med Citrobacter freundii (sent laktoseforgærende). Podeniveau: 1 – 60 cfu pr. prøve. For positive prøver er prøvenummer angivet i parentes. Tallene angiver % positive prøver (n = 5) for hhv. coliforme bakterier og E. coli.

Volumen Positive for Mod. DS 2255
37 °C
Mod. DS 2255
44 °C
Colilert 18 Colilert Readycult
100 ml Coliforme 40%
(7,8)
  60%
(8,9,10)
40%
(9,10)
80% (7,8,9,10)
E. coli   0% 0% 0% 0%
1000 ml Coliforme 100% (6,7,8,9,10)   100% (6,7,8,9,10) 60% (7,9,10) 80% (8,9,10)
E. coli   0% 0% 0% 0%

Resultaterne i tabel 6 viser varierende fund afhængig af den anvendte metode. For prøverne med 100 ml vandprøve findes prøve 9 og 10 positive med alle de tre kommercielle metoder. Prøve 7 og 8 findes positive med den modificerede DS 2255 ved 37 °C samt i Readycult og for prøve 8 også i Colilert-18.

For prøverne med 1000 ml vandprøve – og dermed større mængde ledsageflora – findes prøve 9 og 10 positiv for coliforme bakterier med alle metoderne. For prøverne 6, 7 og 8 findes varierende grad af positive fund.

Podeniveauet viste sig også her at være lavere end beregnet i nogle af prøverne og svingede fra ca. 1 – 60 cfu pr. prøve med:

Ca. 1 cfu i prøve 7 og 9, 3 cfu i prøve 6, 19 cfu i prøve 10 og ca. 30 (4 – 60) cfu i prøve 8.

I lighed med podeniveauerne nævnt for A. hydrophila og Klebsiella kan der med de lave podeniveauer på ca. 1 - 3 cfu være en risiko for, at der reelt ikke er blevet tilsat bakterier til prøverne.

Det kan dog konstateres, at prøve 9 og 10 med hhv. ca. 1 og ca. 19 cfu reagerer positivt for alle de tre kommercielle kits uanset 100 ml eller 1000 ml vandprøve. Der er dog ikke systematik i resultaterne i forhold til podeniveauerne og indenfor de enkelte metoder. Muligvis er der et samspil mellem følgefloraen og podningen, så der i nogle prøver totalt nås et tilstrækkeligt niveau til at give positiv reaktion.

 



Version 1.0 Juli 2004, © Miljøstyrelsen.