Miljøprojekt, 1081 – Screeningsundersøgelse for campylobacter i vand

Screeningsundersøgelse for campylobacter i vand

Bilag D

(informativt)

Supplerende tests til karakterisering af isolater

D.1 Oxidase test

D.1.1 Fremgangsmåde

Udfør testen med frisk kolonimateriale fra den non-selektive plade (8.6) og oxidase reagens (D.1.1). Sammenlign reaktionen med positive og negative kontrolstammers reaktion. Campylobacter er oxidase-positive, men reaktionen kan være forsinket.

D.1.2 Oxidase reagens

Kommercielt tilgængelige oxidase strips kan benyttes til oxidase test. Alternativt bruges en 1 % opløsning i vand af N,N-dimethyl-1,4-phenylen diamin dihydroklorid eller af tetramethyl-p-phenylen diamin dihydroklorid. Disse opløsninger skal være friskt fremstillede, eller opbevaret koldt i kort tid. Kasser farvede opløsninger.

D.2 Katalase test

D.2.1 Fremgangsmåde

Udfør testen med frisk kolonimateriale fra den non-selektive plade (8.6) og katalase reagens (D.2.1). Sammenlign reaktionen med positive og negative kontrolstammers reaktion. Campylobacter er katalase-positive. (C. upsaliensis angives at være katalase-negativ eller svagt positiv).

BEMÆRK Blodet i blodagar kan give en falsk positiv katalase reaktion, hvis noget af agaren skrabes med på podenålen med kolonimateriale.

D.2.2 Katalase reagens

Brug en 2 % eller 3 % opløsning af brintperoxyd, H₂O₂ til katalase test.

D.3 Gram type

D.3.1 Fremgangsmåde

Udfør testen med frisk kolonimateriale fra den non-selektive plade (8.6) og kaliumhydroxyd-opløsning (D.3.1). Campylobacter er gram-negative, d.v.s. trådtrækkende med 3 % kaliumhydroxyd-opløsning.

D.3.1 Kaliumhydroxyd opløsning

Brug en 3 % opløsning af Kaliumhydroxyd, KOH til at bestemme bakteriers Gramtype.