| Forside | | Indhold | | Forrige | | Næste |
Afgivelse af organisk stof fra polymere materialer - mikrobiel vækst
Igennem de indledende undersøgelser til udviklingen af en metode blev det valgt at
fastlægge polymere materialers eftervækstpotentiale ved en to-trins-procedure:
- Steril ekstraktion af materialet
- AOC-bestemmelse på det færdige ekstrakt
Valget af en steril ekstraktion af materialerne giver mulighed for at teste
materialerne under forhold, der ikke ville tillade vækst af testbakterien. Samtidig giver
det mulighed for direkte sammenligning af AOC-værdier imellem ekstrakter, da
AOC-bestemmelsen altid ved være udført på samme vis, uafhængig af ekstraktionsforhold.
Materialet blev ekstraheret ved nedsænkning i testvandet frem for opfyldning af
rørlængder, da dette gav mulighed for at undersøge andre komponenter end rør, såsom
fittings, der kan have stor betydning i f.eks. vandhaner. Der er dog to primære ulemper
ved at ekstrahere materialerne på denne måde: Der kan kun undersøges komponenter, der
er ens på inder- og yderside, og materialet skal udskæres, hvilket medfører at både
naturlige overflader og snitflader er i kontakt med vandfasen. Snitfladerne har ikke
umiddelbart betydning for afgivelsen, men det er en faktor, der kan give anledning til
variation, da den procentdel snitflader udgør af det totale overfladeareal afhænger af
det anvendte rørs dimensioner (Tabel 21). Det bør dog så vidt muligt tilstræbes, at
snitfladerne udgøre så lille en procentdel af overfladearealet som muligt, da
snitfladerne alt andet lige altid vil fremstå mere ru end de naturlige overflader.
Snitflader kan undgås ved at ekstrahere rørmaterialer ved opfyldning af rørlængder,
der samtidig vil give mulighed for at undersøge rør, som ikke er ens på inder- og
ydreside. En sådan ekstraktionsform vil dog i praksis være problematisk at udføre
sterilt. Et mål for eftervækstpotentialet for rør med forskellige inder- og yderside
vil kunne fastlægges ved den valgte metode ved en undersøgelse af rør fremstillet af
indersidematerialet.
Tabel 21:
Procentdel snitflader udgør af totale overfladeareal ved et S/V-forhold på
0,5 cm-1 for de i projektet undersøgte fem polymere rørmaterialer.
|
Diameter |
% snitflader ved |
Materiale |
Ydre |
Indre |
S/V = 0,5 cm-1 |
Blå PEM(1)
Blå PEM(2)
Sort PEM
PVC(Pb)
PVC(Org.)
PVC(Zn/Ca) |
32
20
20
90
110
110 |
29
16
16
81,4
101
99 |
7
5
5
17
23
19 |
Den væsentligste svaghed ved kombinationen af ekstraktion og AOC-bestemmelse er
nødvendigheden af, at ekstraktionen forløber sterilt. I dette projekt har der været en
del problemer med at inaktivere testvandets og/eller postevandets naturlige
bakteriepopulation. Grunden til at problemerne først opstod undervejs i projektets
arbejdet kan formentlig tilskrives ændringer i råvandet, da Lyngby vandværk pumper fra
skiftende boringer. I dette projekt kunne problemet med overlevelse af uønskede bakterier
formentligt være løst ved at skifte vandtype, hvilket dog ville have medført praktiske
besværligheder. Undervejs i arbejdet blev der i nogle tilfælde oplevet relativt høje
blindværdier (ekstraktionen af blå PEM(2) i S/V-undersøgelsen, Kapitel 7 og
serie 3 i undersøgelsen af fem polymere materialer, Kapitel 8), hvilket formentlig også
kan tilskrives variationer i driften (testvandet kan f.eks. være udtaget lige efter et
returskyl). De relativt høje blindværdier har dog ikke haft indflydelse på afgivelsen
fra materialerne, hvilket kan ses ved de sammenlignelige værdier fra ikke-kontaminerede
ekstrakter mellem serie 1, 2 og 3 i undersøgelsen af fem polymere materialer (jævnfør
Tabel 17 i Kapitel 8).
Ved at undersøge afgivelsen fra et polymert materiale, er der tre primære
kvalitetskriterier, der skal overvejes ved kvalitetsvurdering af et ekstrakt:
 | Har ekstraktet været kontamineret med uønskede bakterier under ekstraktionen
(pasteurisering ikke tilstrækkelig effektiv) |
 | Er ekstraktet blevet kontamineret med uønskede bakterier under kimtalsbestemmelserne |
 | Er ekstraktet blevet kontamineret med eksternt organisk kulstof |
I undersøgelsen af fem polymere materialer (Kapitel 8) blev ATP-måling anvendt til at
afgøre, om ekstrakterne havde været kontamineret under ekstraktionen. ATP-måling vil
således kunne anvendes som kvalitetsparameter til kontrol af, om ekstraktet er sterilt
inden podningen med P17 dag 0. ATP-målinger i forbindelse med kimtalsbestemmelser gav i
undersøgelsen af fem polymere materialer (serie 3) en god overensstemmelse imellem
vækstkurver udtrykt ved AOC og ATP (jævnfør Figur 23). Optegnes ATP som funktion af CFU
P17 (for de ikke-kontaminerede ekstrakter fra serie 3), ses en klar tendens til en lineær
sammenhæng, der angiver den enkelte P17-bakteries ATP-indhold til 0,0002 pg ATP/CFU (R2=0,85).
ATP-målinger vil således også kunne anvendes som kontrol under selve AOC-bestemmelsen,
ved at sammenligne CFU P17-værdier med sammenhørende ATP-værdier. Hvis ATP-værdien er
højere end det forventede niveau, er ekstraktet kontamineret med uønskede bakterier, som
ikke detekteres ved kimtalsbestemmelserne på R2A-agar. Hvis et enkelt ekstrakt
afviger med for høj AOC-værdi i forhold til de øvrige replikater, må det antages, at
det pågældende ekstraktet er blevet kontamineret med organisk kulstof, som ikke kan
tilskrives materialet.

Figur 27:
ATP som funktion af CFU P17 baseret på data fra ikke-kontamineret ekstrakter
af fem polymere materialer og tilhørende blindprøver fra serie 3. Ekstraktionerne blev
udført ved 20° C over 15 døgn med omrystning, mens væksten
af P17 foregik ved 15° C.
ATP-målinger vil eventuelt helt kunne erstatte kimtalsbestemmelser ved bestemmelse af
afgivelse fra polymere materialer, hvorved stort set vilkårlige bakteriestammer
(renkulturer) eller en naturlig population (blandingskulturer) kunne anvendes som
standard. Ved undersøgelsen af ekstraktionsmetoder (Kapitel 4) og undersøgelsen af
desinfektion (Kapitel 5) blev der anvendt en naturlig bakteriepopulation, som ved
kimtalsbestemmelserne gav langt mindre forskel på ekstrakter og blindprøver end ved
anvendelse af P17. Dette kan formentlig tilskrives, at en meget lille andel af bakterierne
kunne vokse på R2A-agar eller ved de anvendte inkubationsforhold. Ved måling
af ATP vil der ved anvendelse af en naturlig population formodentlig være langt større
forskel på ekstrakter og blindprøver, da alle bakterier vil blive registreret. Et
problem ved at anvende ATP som parameter vil dog være, at cellerne kan mobilisere deres
ATP-indhold som reaktion på ændringer i vækstforhold og vækststadie /Atlas et al.,
1993/. Svært-nedbrydelige stoffer kunne således resultere i et andet ATP-indhold i
cellen, end hvis denne udsættes for let-nedbrydelige stoffer.
Ud fra de udførte undersøgelser blev der ikke fundet en simpel lineær sammenhæng
imellem afgivelsen udtrykt som AOCP17-værdi og S/V-forhold (jævnfør Tabel
22). Der var en tendens til øget AOCP17-værdi i vandfasen jo større
mængde materiale, der blev ekstraheret, indtil et vist S/V-forhold, hvorover der ikke
blev afgivet væsentlig mere til vandfasen. Ved hvilket S/V-forhold denne hændelse
indtræder er formentlig en kombination af materiale, ekstraktionstemperatur og af, om der
er omrystning under ekstraktionen. Fluxen viste en tendens til omvendt proportionalitet
imellem afgivelsen og S/V-forhold, hvilket ligeledes indikerer, en begrænsning af
afgivelsen fra materialet med stigende S/V-forhold. Mekanismen omkring afgivelsen er
stadig uklar, da forlænget ekstraktionstid og omrystning gav øget afgivelse ved
S/V-forhold, hvor der ikke var forskel i afgivelsen som følge af S/V-forhold. Da en
observeret afgivelse ikke direkte kan skaleres med S/V-forhold, kompliceres tolkningen af
testresultater.
Tabel 22:
Testforhold og opnåede afgivelser (fratrukket blindværdi) for de udførte
undersøgelser med P17. *Ekstrakter var kontamineret med uønskede bakterier (benævnt
NN).
Materiale |
Temp. |
Omryst-
ning |
Ekstrak-
tionstid |
S/V- forhold |
AOCP17 |
Flux |
|
[° C] |
|
[døgn] |
[cm-1] |
[mg
acetat-C/L] |
[´ 10-3
mg acetat-
C/d/cm2] |
PEM(1) |
10 |
Uden |
9
20 |
0,5
1,0
0,5
1,0 |
24
29
56
50 |
5,2
3,2
5,6
2,5 |
Sort PEM |
10 |
Uden
Med |
15
15 |
0,5
1,0
0,5
1,0 |
29*
30*
35*
45* |
3,8*
2,0*
4,7*
3,0* |
Blå PEM(2) |
20 |
Med |
5
15 |
0,14
0,69
0,07
0,14
0,27
0,41
0,55
0,69
1,38 |
23
31
8
14
29
20
31
57
50 |
66,9
9,0
8,5
7,0
7,9
3,4
3,8
5,6
2,4 |
Blå PEM(2) |
20 |
Med |
15 |
0,5 |
33 |
4,4 |
Sort PEM |
20 |
Med |
15 |
0,5 |
41 |
5,5 |
PVC(Zn/Ca) |
20 |
Med |
15 |
0,5 |
26 |
3,5 |
PVC(Pb) |
20 |
Med |
15 |
0,5 |
27 |
3,6 |
PVC(Org.) |
20 |
Med |
15 |
0,5 |
34 |
4,5 |
I Tabel 22 er resultater fra de udførte undersøgelser med P17
opsummeret. I alle undersøgelserne blev der opnået en signifikant afgivelse fra alle de
undersøgte materialer. Med S/V-forhold i intervallet 0,07-1,38 cm-1 lå AOCP17-afgivelserne
for de undersøgte materialer i intervallet 8-57 mg acetat-C/L.
Disse værdier skal vurderes ud fra, at der har været anvendt betydeligt længere
opholdstider under ekstraktionen af materialerne, end der normalt vil forekomme i
distributionssystemet, og at ekstraktionerne er foretaget i stillestående vand (i nogle
tilfælde med lettere omrystning) i modsætning til et (sædvanligvis) kontinuert, om end
varierende over døgnet, flow i distributionssystemet. Ligeledes er ekstraktionerne
udført sterilt, hvorved der ikke er har været kontakt mellem bakterier og materialer
(ingen biofilmdannelse på materialeoverfladerne). I et distributionssystem vil den
primære del af biomassen findes som biofilm på rørindersiderne. Det kan ikke afvises,
at bakterier i en sådan biofilm vil kunne trække substrat ud af
materialerne, og at en sådan aktiv afgivelse vil have større betydning end den passive
afgivelse i de udførte ekstraktionstest. Ligeledes vil bakterier i en biofilm blive udsat
for en langt stejlere koncentrationsgradient end bakterierne i vandfasen.
Med disse forbehold i mente, kan der ud fra data i Tabel 22 (der ses
bort fra 5 døgns ekstraktionerne) opstilles en simplificeret vurdering af, om bidraget
fra polymere materialerne vil have betydning ude i distributionsnettet. For at forenkle
beregningerne benyttes antagelsen, at afgivelsen foregår kontinuert over tid.
Distributionsnettet kan efter indre rørdiameter opdeles i hovedledninger 305-1200 mm,
forsyningsledninger 50-292 mm /Københavns vand, 1998/ og i stikledninger samt
husinstallationer, der går ned til 7 mm. S/V-forholdene er i hovedledningerne 0,03-0,13
cm-1, i forsyningsledningerne 0,14-0,80 cm-1 og i
stikledninger/husinstallationer 0,80-5,7 cm-1 (opsummeret i Tabel 23).
Sædvanligvis vil opholdstiden i byinstallationer ikke overskride et par dage, mens der
ved lange forsyningsledninger til landområder kan være opholdstider op til 2 uger.
Tabel 23:
Generelle S/V-forhold i distributionssystemet.
Rørtype |
Diameter
[mm] |
S/V-forhold
[cm-1] |
Hovedledninger
Forsyningsledninger
Stikledninger/husinstallationer |
305-1200
50-292
7-50 |
0,03-0,13
0,14-0,80
0,80-5,7 |
Derved vil bidraget fra polymere materialer i hovedledningerne kun bidrage med under 1 mg acetat-C/L/d til vandfasen. I forsyningsledningerne vil
AOC-bidraget til vandfasen være i en størrelsesorden af 1-3 mg
acetat-C/L/d, mens det tilsvarende bidrag i stikledninger/husinstallationer vil være i en
størrelsesorden af 3 mg acetat-C/L/d. Disse værdier skal
sammenholdes med generelle AOC-niveauer i dansk drikkevand.
I en undersøgelse, der bl.a. omfattede bestemmelse af AOC-niveauer i dansk drikkevand,
blev der for 10 danske vandværker fundet værdierne angivet i Tabel 24. Det
færdigbehandlede vands AOC-værdier var grupperet med værdier dels under 10 mg acetat-C/L, og dels i et interval imellem 20 og 40 mg acetat-C/L. Sammenholdt med de anslåede niveauerne fra
ovenstående afsnit vil afgivelser fra rørmaterialerne have mindre betydning i
forbindelse med vand fra den sidste kategori, og vil ved normal drift hellere ikke give
direkte anledning til problemer i vand fra den første kategori. Ved lange
forsyningsledninger med opholdstider på f.eks. 4 døgn, vil der dog være risiko for, at
vandets AOC-indhold kan fordobles under vejen til forbrugeren:

Ligeledes vil vand, der får lov at henstå i husinstallationerne f.eks. hen over en
weekend kunne opnå et betydeligt AOCP17-bidrag:

6-8 mg acetat-C/L svarer til 2,5-3,3*104
CFUP17/mL. Til sammenligning indeholder frisktproduceret vand fra Lyngby vandværk i
størrelsesordnen 200 CFU/mL bestemt som kimtal på R2A-agar.
Ved lange forsyningsledninger kan vandets naturlige indhold af AOC være forbrugt
undervejs til forbrugeren, og et AOC-bidrag fra rørmaterialet i husinstallationen vil
således få en langt større betydning for vandkvaliteten.
Tabel 24:
AOC-indhold i færdigbehandlet drikkevand fra 10 danske vandværker
/Jørgensen et al., 2000/.
Vandværk |
AOC
[mg acetat-C/L] |
95%
konfidensinterval |
Islevbro
Thorsbro
Haraldsbro
Slangerup
Tisvilde
Sjælsø
Ullerup
Kisserup
Rørvig |
3,7
4
4
5
5,0
6
20
27
39 |
± 0,8
± 2
± 1
± 2
± 0,2
± 2
± 6
± 5
± 9 |
| Forside | | Indhold | | Forrige | | Næste | | Top
| |
|