| Forside | | Næste |

Mikrobiologiske plantebeskyttelsesmidlers skæbne i mave-tarm kanalen

Indholdsfortegnelse

Forord

Sammenfatning

Summary

1 Indledning

• 1.1 Baggrund
• 1.2 Formål med projektet
• 1.3 Fremgangsmåde
• 1.4 Rapportens opbygning

2 Materialer og metoder

• 2.1 Anvendte Bacillus cereus og Bacillus thuringiensis stammer
  • 2.1.1 Fremstilling af antibiotika-resistente stammer
• 2.2 Mærkning af bakterier med fluorescens
• 2.3 Dyreforsøg
  • 2.3.1 Kimfri rotter
  • 2.3.2 Human Flora Associerede (HFA) rotter
  • 2.3.3 Udførte dyreforsøg
• 2.4 Undersøgelser af effekter på omkringliggende flora
  • 2.4.1 Kimtællinger af fæces- og tarmprøver
  • 2.4.2 Molekylær metode
• 2.5 Enterotoksin assays
  • 2.5.1 Immunologisk detektion af HBL
  • 2.5.2 Vero-celle assay
  • 2.5.3 Bestemmelse af detektionsgrænsen i Vero-celle assay
  • 2.5.4 Effekt af vækstbetingelser på Vero-toksiske substanser
  • 2.5.5 Betydningen af sterilfiltrering for indholdet af Vero-toksiske substanser
  • 2.5.6 Ekstraktion af potentielle Vero-toksiske substanser fra tarmprøver
  • 2.5.7 Indflydelse af fæces på genfindelse af Vero-toksiske substanser

3 Resultater

• 3.1 Overlevelse og spiring af Bt og B. cereus celler i tarmen
  • 3.1.1 Resultater fra HFA dyr
  • 3.1.2 Overlevelse af sporer og vegetative celler i simuleret mavevæske
  • 3.1.3 Bt subsp. israelensis i kimfri dyr
  • 3.1.4 Opsummering
• 3.2 Ændringer af den normale tarmflora
  • 3.2.1 Kimtællinger af bakteriegrupper
  • 3.2.2 Ændringer af tarmflora studeret vha. DGGE
  • 3.2.3 Opsummering
• 3.3 Enterotoksiner i tarmen
  • 3.3.1 Vero-toksiciteten af forskellige bakterier
  • 3.3.2 Detektion af Vero-toksisk aktivitet i tarmprøver fra rotter
  • 3.3.3 Opsummering
• 3.4 Overførsel af DNA mellem to Bt stammer i kimfri rotter
  • 3.4.1 Dyreforsøg med kimfri dyr
  • 3.4.2 Opsummering

4 Diskussion

• 4.1 Overlevelse og spiring i tarmen
• 4.2 Påvirkning af den eksisterende bakteriepopulation
• 4.3 Dannelse af enterotoksiner i tarmen
• 4.4 Overførsel af DNA i tarmen

5 Perspektiver

• 5.1 Anbefalinger til Miljøstyrelsen vedr. risikovurdering af Bt midler
• 5.2 Anbefalinger til fremtidig forskningsindsats

6 Konklusion

Referencer

Bilag A

• 1.1 Kort over anvendt plasmid
• 1.2 Fremstilling af dosis-kulturer
• 1.3 DNA oprensning fra fæcesprøver
• 1.4 Anvendte primere og DGGE betingelser
• 1.5 DGGE kørsel
• 1.6 Sekventering af bånd fra DGGE geler
• 1.7 DGGE data fra B. cereus forsøget
• 1.8 DGGE data fra Bt subsp. kurstaki forsøget
• 1.9 DGGE data fra Bt subsp. israelensis forsøget
• 1.10 Formidling relateret til projektet
• 1.11 Trykt publikation

| Forside | | Næste | | Top |

Version 1.0 Januar 2007, © Miljøstyrelsen.